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一种融合蛋白PEG-rSAK新型溶栓药物及其制备方法

申请号: CN200610089452
申请日: 20060628
公开(公告)号: CN101096660A
公开(公告)日: 20080102
IPC分类号: C12N9/00;C12N9/50;C12N15/58;C12N15/62;C07K19/00
主分类号: C12N9/00
申请(专利权)人: 中国科学院生物物理研究所;
发明人: 李国明;张春玲;梁伟;饶子和
优先权号: 暂未提供
优先权日: 暂未提供
地区: 北京;11
申请人地址: 100101北京市朝阳区北沙滩大屯路15号
代理人: 王旭
专利代理机构: 中科专利商标代理有限责任公司
本发明公开了一种基于葡激酶结构特性的新型长效溶栓药物,还公开了其制备方法及用途。本发明采用蛋白融合技术构建了融合蛋白,该融合蛋白在保留葡激酶特异性识别血栓的基础上融合了水蛭素的溶栓活性片段以及在C端加入一段血浆纤维蛋白溶酶原的激活因子(t-PA)的K2结构域,以增加葡激酶的血浆纤维蛋白特异结合的能力和增加其抗血栓的活性,融合后蛋白在溶栓及特异选择性方面都得到显著地提高。通过基因操作的方式将葡激酶或其衍生物的36,66,75,83,85,91,100,102,109,110,131,136位氨基酸顺序替换为丙氨酸,甘氨酸,精氨酸,丙氨酸,丙氨酸,丙氨酸,天门冬氨酸,丝氨酸,丙氨酸,丙氨酸,色氨酸,精氨酸以减少其免疫原性。融合蛋白经大肠杆菌表达、分离、纯化后进行聚乙二醇化修饰以最大限度地降低免疫原性和延长体内半衰期。本发明的基于葡激酶的融合蛋白是一种长效和高效溶栓药物,具有溶栓和抗凝双重活性。

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